DNA甲基化——甲基化DNA PCR & NGS 分析試劑盒

DNA甲基化(DNA methylation)為DNA化學修飾的一種形式,能夠在不改變DNA序列的前提下,改變遺傳表現。所謂DNA甲基化是指在DNA甲基化轉移酶的作用下,在基因組CpG二核苷酸的胞嘧啶5號碳位共價鍵結合一個甲基基團。大量研究表明,DNA甲基化能引起染色質結構、DNA構象、DNA穩定性及DNA與蛋白質相互作用方式的改變,從而控制基因表達。

一、DNA甲基化修飾相關產品

DNA甲基化修飾研究手段——DNA亞硫酸鹽轉化,使用亞硫酸氫鈉將胞嘧啶轉化為尿嘧啶,而5-甲基胞嘧啶(5-mC)保持完整。 即未甲基化的胞嘧啶殘基被脫氨成尿嘧啶,甲基化的胞嘧啶(5-mC)殘基不受影響,這使PCR擴增可將尿嘧啶視為胸腺嘧啶,將5-mC或5-hmC識別為胞嘧啶。 這樣便能夠區分甲基化和未甲基化的胞嘧啶殘基,從而提供有關DNA甲基化區域的單核苷酸解析度資訊。

DNA甲基化——甲基化DNA PCR & NGS 分析試劑盒

要成功地進行DNA甲基化研究,必須進行完全轉化,並減少通常由於嚴酷的化學反應而導致的DNA降解量。基於亞硫酸氫鹽和亞硫酸氫鈉的方法是用於研究DNA甲基化並幫助製備基因組DNA進行基因特異性DNA甲基化分析的常用方法。 亞硫酸氫鹽轉化後通常是下游應用,在基因特異性基礎上分析DNA甲基化的流行下游方法包括亞硫酸氫鹽測序,甲基化特異性PCR(MS-PCR)和基於甲基化的微陣列。

整個轉換過程中,高質量的DNA是至關重要的,因為轉換過程中的酸性物質會破壞DNA。而對於大規模亞硝酸氫鹽轉化實驗,高通量選擇對於節省時間和降低成本至關重要。

DNA甲基化——甲基化DNA PCR & NGS 分析試劑盒

此外,還有高通量DNA修飾試劑盒,EpiNext高靈敏度亞硫酸氫鹽測序試劑盒(Illumina),一步法DNA修飾試劑盒,Methylamp通用甲基化DNA試劑盒,Methylamp全細胞亞硫酸氫鹽修飾試劑盒等。

二、甲基化DNA PCR & NGS 分析試劑盒

上面我們瞭解了DNA甲基化修飾相關的產品,也瞭解了DNA經過修飾後適用於下游分析:如亞硫酸氫鹽測序、甲基化特異性PCR(MS-PCR)和基於甲基化的微陣列。

DNA甲基化——甲基化DNA PCR & NGS 分析試劑盒

三、甲基化DNA免疫沉澱

甲基化DNA免疫沉澱(meDIP)是一種基於抗體的大規模技術,用於富集和捕獲甲基化DNA片段,可用於在基因組範圍內進行基因特異性DNA甲基化研究。 遵循meDIP方法,可以使用多種下游應用程式分析DNA甲基化,包括meDIP-PCR,meDIP-ChIP和meDIP測序。

DNA甲基化——甲基化DNA PCR & NGS 分析試劑盒

我們來看看富集的效果,系列圖分別對應p-1015,p-1038,p-1052

DNA甲基化——甲基化DNA PCR & NGS 分析試劑盒

四、DNA甲基化抗體

具有良好特徵和高度驗證的DNA甲基化抗體和DNA去甲基化抗體可能有助於提高研究人員對DNA甲基化及其在疾病、細胞週期調控和胚胎髮育中的作用的理解。如:

5-Hydroxymethylcytosine (5-hmC) Monoclonal Antibody [HMC/4D9],A-1018,適用實驗型別:DB, ELISA, hMeDIP, IF, IHC;

DNMT1 Monoclonal Antibody [60B1220。1],A-1001,適用實驗型別:ELISA, IF, IP, WB

文章來源:每日生物評論

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