小核酸藥物，近幾年在乙肝研究領域取得了一定積極結果，其包含著小干擾RNA（siRNA）和反義寡核苷酸（ASO）。siRNA分子，miRNA從特定基因轉錄為前體轉錄本，這些轉錄本經過核Drosha-DGCR8微處理器複合物和RNase III 酶Dicer的修飾後，產生≈ 22 bp miRNA 雙鏈體。

乙肝在研小核酸藥物代表，siRNA以及ASO，簡介作用原理及候選藥物

這是一個不完美的雙鏈體，具有2 nt 3‘ 突出端。選擇兩條miRNA鏈中的一條，載入到RNA誘導的沉默複合物（RISC）的Argonaute （AGO） 蛋白上。然後，RISC與信使RNA的3’ 非翻譯區中的互補結合位點結合，導致它們的去腺苷酸化、翻譯抑制或降解。如果miRNA和mRNA之間存在近乎完美的互補鹼基配對，則嚮導RNA-AGO複合物會降解目標mRNA。

由於合成的siRNA會誘導RNAi（基因沉默），因此它們可用於透過靶向HBVRNA來抑制乙肝病毒複製。HBV產生具有共同3‘ 末端的重疊轉錄本，即單個siRNA。因此，它們可以同時影響許多病毒的mRNA。

為了把siRNA成功地傳遞到肝細胞，還需要一些載體，因為裸siRNA是無法進入細胞的。科學家已經評估了非病毒載體，例如，脂質奈米顆粒、穩定的核酸顆粒、N-乙醯半乳糖胺 （GalNac/NAG） 以及病毒載體。GalNac偶聯的siRNA，已經成為肝靶向遞送的流行選擇方法！同樣，病毒載體，尤其是腺相關病毒載體，也表現出良好療效。

相比siRNA，ASO的作用原理是它們的DNA或RNA的單鏈片段透過鹼基配對與mRNA的互補序列結合，分別形成DNA：RNA（反義DNA）的雜交體和RNA：RNA（反義RNA）的雙鏈體。隨後，宿主核糖核酸酶H依賴性機制降解mRNA轉錄物並使蛋白表達沉默。

簡要描述過siRNA和ASO的研發技術後，我們再介紹一下，這些藥物靶點的乙肝候選藥物，其中許多都正在第2期組合療法研究中。Arbutus Biopharma公司的AB-729，是一款基於RNAi療法的乙肝候選藥物，該RNAi與三天線GalNAc共價結合。

在AB-729一項早期臨床開發中，試驗物件為HBVDNA檢測不到且ALT≤ 5 X ULN 的健康個體和非肝硬化慢性乙肝受試者，給予單劑不同濃度的AB-729。結果表明，在12周時，60毫克組、90毫克組和180毫克AB-729劑量下，受試者的乙肝表面抗原（HBsAg）平均下降分別為 0。99 log10、1。31 log10和0。98 log10。未觀察到嚴重不良事件或因不良事件導致停藥（試驗資料和結論來自Arbutus Bio）。

小番健康結語：基因沉默療法，已經廣泛應用於治療各種疾病的藥物開發，透過介紹不難看出siRNA已經成為小核酸藥物中的熱門方向。從原理上，siRNA和ASO有著十分近似的開發特點，無論醫藥研發技術如何前沿，它們的應用目標依舊是提供有意義的臨床需求轉化。